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墨汁负染色法原理

墨汁负染色法原理

墨汁负染色法是一种常用的显微镜染色技术,其原理在于使用墨汁作为染料,在染色过程中背景被着色而菌体本身不着色。这种方法特别适用于观察细菌和某些真菌的荚膜等结构,因为它能在黑色或暗色背景上清晰地显示菌体的形态,使得观察更为直观。

以下是墨汁负染色法的基本步骤和注意事项:

步骤:

1. 准备试剂 :使用印度墨汁作为染料。

2. 样本处理 :将脑脊液等标本进行离心,取沉淀物或挑取菌液。

3. 染色 :

将墨汁用生理盐水稀释(例如墨汁1:10)。

滴加半滴稀释后的墨汁至菌液中,并轻轻混匀。

盖上盖玻片,注意要慢慢斜放以避免产生气泡。

4. 观察 :使用油镜进行观察。

注意事项:

质控标准 :例如新型隐球菌ATCC32609作为阳性对照,白念珠菌ATCC90038作为阴性对照。

菌体特性 :某些细菌或真菌的荚膜较厚,不易着色,而菌体折光性强,在墨汁负染色法下可在黑色背景中看到透亮的菌体。

操作技巧 :在盖玻片放置时要小心,避免产生气泡,这可能会影响观察结果。

墨汁负染色法是一种简单而有效的染色技术,它允许在不破坏样本的情况下观察菌体结构,特别是对于那些不易用常规染色方法着色的微生物

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